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TSKgel UP-SW3000色谱柱 的详细资料 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
TSKgel UP-SW3000色谱柱 采用粒径为2 μm,键合了二醇基的硅胶颗粒充填。是一款用于生物大分子分离用的尺寸排阻色谱分析柱。填料粒径为2 µm,适合用于蛋白质、抗体、酶等生物大分子的快速分析(15 cm 规格柱)以及高分辨率分析(30 cm 规格柱)。 与现有产品TSKgel SW系列色谱柱具有相同的填料表面特性。・ 填料的特性(孔隙容量、校正曲线的斜率)与TSKgel G3000SWXL 相同,所以非常适合用来分离抗体(IgG)的二聚体、单体、抗体片段。两种色谱柱尺寸可供选择:
• 4.6 mmI.D. x 30 cm 的规格可用于超高分辨率的分析。 • 可同时兼容于UHPLC和HPLC系统 • 必须使用半微型液相系统,即,较小死体积的液相系统才能实现较为理想的色谱柱性能。 (separate report No.116)抗体药物中使用的单克隆抗体,在生产、贮藏或运输过程中可能会形成二聚体等凝聚物,存在引发不良反应的风险因素,故在质量控制中采用体积排阻色谱法(SEC)对单克隆抗体进行分离分析。现有的 TSKgel UP-SW3000色谱柱常用于此用途,但仍需要高分离度以及短分析时间的SEC 分析技术。现在 2μm 粒径的高性能 SEC 色谱柱TSKgel UP-SW3000 已实现了商品化。在本报告中,介绍了 TSKgel UP-SW3000色谱柱的基本特性及其分离实例。 TSKgel UP-SW3000 色谱柱的基本特性 TSKgel UP-SW3000色谱柱 填料的特性
表
1 所示为 TSKgel UP-SW3000色谱柱的填料特性、色谱柱规格,以及与常用于抗体分离的现有 SW 型色谱柱的性能对比。TSKgel UP-SW3000 色谱柱是以 25nm 孔径硅胶表面导入二醇基后形成的 2μm 微粒为填料的色谱柱。与现有 SW 型色谱柱相比,具有高的分离性能,适用于抗体二聚体及单体的分离。 表 1:填料特性、色谱柱规格
标准曲线和分离性能
使用
TSKgel UP-SW3000、TSKgel SuperSW3000(4μm)及 TSKgel G3000SWXL(5 μm)测定标准蛋白质的色谱图对比如图 1 所示,采用标准蛋白质制成的校正曲线对比如图 2 所示。具有相同孔径特性的 TSKgel UP-SW3000、TSKgel SuperSW3000 及
TSKgel G3000SWXL 中,甲状腺球蛋白的二聚体及多聚体不会渗入小孔内而排出,进入间隙体积(V0)(图 1),校正曲线的斜率相同(图 2)。表 2所示为样品核糖核酸酶 A 的理论塔板数。粒径较小的TSKgel UP-SW3000 比其他色谱柱的理论塔板数高。图 3 所示为使用 TSKgel UP-SW3000、TSKgel SuperSW3000、及
TSKgel G3000SWXL 分离单克隆抗体的色谱图对比,表 3 所示为各溶出峰分离度(R)的对比。粒径较小的 TSKgel UP-SW3000 比其他色谱柱的分离度高。(separate report No.116)TSKgel UP-SW3000色谱柱 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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